真核表达载体pcDNA3.1-myc-his(-)B的改构与应用

作者：钱晓龙; 周建光

来源：生物技术通讯, 2010, (02): 158-162.

• pcDNA3.1-myc-his(-)B
• 改构
• 多克隆位点
• pcDNA3.1(-)reconstruct
• 限制酶位点
• 目的基因 pcDNA3.1-myc-his(-)B
• reconstruction
• multiple clone site
• pcDNA3.1 (-)reconstruct
• restriction sites
• target gene

目的:对真核表达载体pcDNA3.1-myc-his(-)B进行改构,以简化目的基因克隆的步骤。方法:用事先设计好的2条寡核苷酸链互相退火,替换pcDNA3.1-myc-his(-)B的多克隆位点中NotⅠ与HindⅢ间的部分;利用改构的真核表达载体,分别构建亲环蛋白A、胆绿素还原酶B和过氧化氢酶基因的重组真核表达载体,瞬时转染293T细胞后,用His标签抗体验证其表达。结果:测序结果证实已将预想的序列替换至pcDNA3.1-myc-his(-)B的多克隆位点中相应位置,改构为质粒pcDNA3.1(-)reconstruct;利用改构的真核表达载体表达了相应的目的基因。结论:改构的真核表达载体...

• 出版日期2010
• 单位中国人民解放军军事医学科学院