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摘要
用含mini-Mu的多拷贝质粒pEG5005体内克隆了大肠杆菌脯氨酸基因ProA~+B~+,其Pro~+克隆频率为1.46×10~(-3)/Kan~r转导子。遗传和生化分析表明这些克隆的Pro~+基因位于质粒上,用生长谱法对若干克隆子作了脯氨酸产量测定,但未检测出脯氮酸的积累。通过细胞内诱变Pro~+克隆pPR3获得的去反馈抑制突变质粒pPR7,在脯氨酸ProAB基因缺失的寄主中可积累0.35mg/ml的脯氨酸,将此克隆转移至产1mg/ml脯氨酸的受体菌,其产酸量达2.5mg/ml,比受体高2.5倍,比供体提高了7倍,文中还对pEG5005和克降pPR3作了内切酶分析。
- 出版日期1990
- 单位中国科学院微生物研究所
