马克斯克鲁维酵母羰基还原酶基因的克隆与表达

作者：应国清; 杨岳微; 梅建凤; 易喻; 金志华

来源：微生物学通报, 2013, (08): 1393-1402.

DOI：10.13344/j.microbiol.china.2013.08.021

• 羰基还原酶
• 马克斯克鲁维酵母
• 不对称还原 Carbonyl reductase
• Kluyveromyce marxianus
• Asymmetric reduction

【目的】研究羰基还原酶基因的克隆、表达及其在不对称生物催化中的应用。【方法】对羰基还原酶氨基酸序列进行BLAST推导出核苷酸序列,设计引物,以马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyce marxianus)CGMCC 2.1977全基因组为模板,通过PCR扩增目的片段,与载体pET-28a连接,转化大肠杆菌获得重组菌BL21(DE3)-(pET28a-cMCR)和Rosetta(DE3)-(pET28a-cMCR)。【结果】扩增的序列与已报道的mer序列有100%同源性,全长1 038 bp,共编码345个氨基酸。目的蛋白在Rosetta(DE3)-(pET28a-cMCR)得到了高效表达,大...

• 出版日期2013
• 单位浙江工业大学; 浙江大学宁波理工学院