内质网应激因子NAC089突变体的创建及其对病毒侵染胁迫的响应

作者：焦裕冰; 秦元霞; 何青云; 李方方; 申莉莉^*; 杨金广^*; 吴元华

来源：植物病理学报, 2018, 48(04): 509-517.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.000222

• 转录因子NAC089
• CRISPR/Cas9
• 病毒侵染
• 内质网应激

有研究表明烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)或黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)侵染烟草能够激活转录因子Nb NAC089,从ER膜移至细胞核。为进一步阐释内质网应激因子Nb NAC089对病毒侵染胁迫的响应机制,利用CRISPR/Cas9技术构建敲除载体,经烟草遗传转染获得Nb NAC089基因突变植株。植株接种病毒后采用qRTPCR检测病毒CP基因和寄主UPR基因的表达。结果表明:CRISPR/Cas9系统定点敲除Nb NAC089基因后,目的基因靶位点序列有碱基的置换与缺失。正常生长条件下,转基因植株与野生型无差异。植株接种TMV-GFP后2496 h,突变体中UPR基因(Bi P、b ZIP28、b ZIP60)的表达量显著高于野生型;接种TM V-GFP后26 d突变体中病毒的积累量和扩展速度显著高于野生型。表明Nb NAC089为UPR的抑制因子,对病毒增殖具有负调控作用。

• 出版日期2018
• 单位中国农业科学院烟草研究所; 沈阳农业大学