SOE-PCR法合成狂犬病毒单链抗体基因Fv57

作者:谷铁军; 张凤羽; 段冶; 卫巍; 姜春来; 吴永革; 孔维
来源:生物技术, 2011, (03): 36-39.
DOI:10.3969/j.issn.1004-311X.2011.03.070

摘要

目的:通过一系列短引物拼接合成狂犬病毒糖蛋白单链抗体基因Fv57。方法:采用SOE-PCR的方法,利用多条短的寡核苷酸引物,经过6轮PCR,拼接合成800bp左右的狂犬病毒糖蛋白单链抗体基因Fv57,并利用此方法修正了上述PCR过程中产生的多处突变,从而获得正确的单链抗体基因序列。结果:采用SOE-PCR法合成的基因序列经测序及酶切鉴定,与预期结果一致。结论:成功地利用SOE-PCR法合成了狂犬病毒糖蛋白单链抗体基因Fv57,为其下一步构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达奠定基础。

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