响应曲面优化-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测粪便中诺如病毒

作者：阮佳; 许欣; 孙成均; 刘亚攀; 周梦莹; 李永新

来源：分析试验室, 2013, (09): 6-10.

DOI：10.13595/j.cnki.issn1000-0720.2013.0228

• 诺如病毒
• 逆转录PCR
• 毛细管电泳
• 激光诱导荧光检测
• 响应曲面优化 Norovirus
• Reverse transcription polymerase chain reaction
• Capillary electrophoresis
• Laser induced fluorescence detector
• Response surface methodology

建立了粪便中诺如病毒逆转录PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测方法。根据诺如病毒核酸保守序列选择引物,扩增出特异的PCR产物;采用响应曲面法进行毛细管电泳条件优化,以含有DNA荧光染料SYBR Gold的0.5%甲基纤维素为筛分介质,通过激光诱导荧光法检测诺如病毒的PCR产物。在优化的毛细管电泳条件下,9 min内可完成诺如病毒PCR产物的检测。扩增产物测序后,与基因库中诺如病毒的序列进行同源性比对,一致性达99%。迁移时间的日内和日间相对标准偏差分别为1.1%~1.3%和1.8%~2.6%,已用于粪便中诺如病毒的快速检测。

• 出版日期2013
• 单位四川大学