堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建及鉴定

作者：闫晓菲; 韩红玉; 岳城; 黄兵; 赵其平; 姜连连; 董辉; 卞庆松; 张建哲

来源：复旦学报(自然科学版), 2007, (06): 937-940+946.

• 鸡
• 球虫
• 堆形艾美耳球虫
• 孢子化卵囊
• cDNA文库 chicken
• coccidia
• Eimeria acervulina
• sporulated oocysts
• cDNA library

构建堆形艾美耳球虫(Eimeria acervulina)孢子化卵囊cDNA表达文库,以筛选其功能性基因.用TRI-ZOL Reagent试剂提取堆形艾美耳球虫总RNA,再用Oligo(dT)12-纤维素柱从总RNA中分离mRNA,以mRNA为模板,RT-PCR法反转录合成cDNA第一链,用LD-PCR法扩增合成双链cDNA,经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切、CHROMA SPIN-400柱分离去除小于400 bp的片段后,将cDNA与已经SfiⅠ酶切的λTriplEx2载体按一定比例连接,经体外包装,建立堆形艾美耳球虫孢子化卵囊的噬菌体表达文库.随后测定文库容量为4.6×106pfu/mL,扩增...

• 出版日期2007
• 单位新疆农业大学; 中国农业科学院上海兽医研究所