蛋白激酶SGK3基因的克隆及其在乳腺癌细胞中的表达

作者：郭红艳; 孙晓杰; 李淑艳; 刘秀财; 刘波; 王宏兰; 蒋瑞雪

来源：中国老年学杂志, 2015, (15): 4187-4189.

• 糖皮质激素调节蛋白激酶3
• 基因克隆
• 乳腺癌

目的探讨通过克隆蛋白激酶(SGK)3基因并将其转染乳腺癌MCF-7细胞建立高表达SGK3的MCF-7细胞系的稳态性。方法利用真核表达载体N-端增强型绿色荧光蛋白(p EGFP-N1)通过基因克隆技术构建重组质粒,通过菌落PCR和DNA测序方法对重组质粒进行鉴定。通过PEI介导将重组质粒p EGFP-N1-SGK3转染至乳腺癌MCF-7细胞中,荧光显微镜和Western印迹方法对基因转染效率以及融合蛋白GFP-SGK3的表达进行鉴定。结果成功构建了真核表达质粒,将其命名为p EGFP-N1-SGK3;在荧光显微镜下可见多数细胞发出绿色荧光,表明获得了较高的转染效率;Western印迹结果显示,在...

• 出版日期2015
• 单位齐齐哈尔医学院