Snail启动子荧光素酶报告基因载体的构建及其应用

作者：江冠民; 李玲玲; 张坤水; 谢婉莹; 张秋桂; 杜军

来源：中国现代医学杂志, 2013, (31): 12-17.

• 上皮细胞间质变
• Snail
• 肿瘤转移
• 启动子 epithelial-mesenchymal transitions
• Snail
• tumor metastasis
• promoter

目的构建Snail启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic-Snai1-luc并对其进行生物活性的鉴定及其初步的应用研究。方法通过PCR技术从人血液基因组中钓出我们需要的具有启动子活性的Snail片段,双酶切后与双酶切的pGL3-Basic空载体连接成重组体pGL3-Basic-Snai1-luc,通过转化扩增,筛选出阳性克隆,并通过酶切,测序及生物学活性检测鉴定构建好的荧光素酶报告基因载体。结果成功地构建了pGL3-Basic-Snai1-luc荧光素酶报告基因载体,并在CNE2细胞内鉴定了其在TGF-β1的诱导下,能启动荧光素酶的表达。此外,笔者通过Western blotting检...

• 出版日期2013
• 单位中山大学附属第五医院; 中山大学; 南华大学附属第一医院