摘要

应用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从A型产气荚膜梭菌中国标准株C5 7 1中 ,扩增出大小约 1.2kb的A型产气荚膜梭菌α毒素全基因 (cpa12 5 4基因 ) ,并将其克隆入pMD18 T载体中。转化至受体菌DH5α后 ,经Amp/IPTG/X Gal选择培养 ,提取质粒 ,PCR和EcoRⅠ /PstⅠ双酶切鉴定 ,筛选阳性重组克隆。核苷酸序列分析证实 ,cpa12 5 4基因阅读开放框架由 1194bp组成 ,编码398个氨基酸残基。经GenBank数据库的BLAST检索比对分析 ,cpa12 5 4基因序列与国外文献报道者同源性达 99% ,表明本实验所克隆的cpa12 5 4...

  • 出版日期2004
  • 单位中国兽医药品监察所