构建psiCHECK-2-解耦联蛋白2双荧光素酶报告基因及其荧光素酶活性的分析

作者：琚丽萍; 邱妙颜; 陈瑛; 田景琰

来源：内科理论与实践, 2013, (06): 414-418.

• 解耦联蛋白2
• 微小RNA-15b
• 双荧光素酶报告基因 Uncoupling protein 2
• MicroRNA-15b
• Dual-luciferase reporter gene

目的:构建含解耦联蛋白2(UCP2)-3’非翻译区(UTR)序列的野生型和突变型质粒的双荧光素酶报告基因载体,探讨微小RNA(miR)-15b对UCP2基因表达的调控作用。方法:应用生物信息软件预测miR-15b的靶基因,分别将预测靶基因UCP2的3’UTR及其突变体克隆到荧光素酶载体psiCHECK-2骨架中,构建UCP2野生型和突变型质粒。并采用测序方法鉴定psiCHECK-2-UCP2载体是否构建成功。将UCP2野生型和突变型质粒分别与miR-15b模拟物、miR-15b模拟物正常对照、miR-15b抑制剂、miR-15b抑制剂正常对照在293T细胞中共转染。通过双荧光素酶报告基因检测分...

• 出版日期2013
• 单位上海交通大学医学院附属瑞金医院