Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ调节原肌球蛋白1对海洛因所致心肌细胞节律异常的影响

作者：季敏; 苏丽萍; 刘丽; 管雅玲; 肖锦玲; 蒲红伟^*

来源：新疆医科大学学报, 2022, 45(11): 1231-1236.

• 海洛因
• 心律失常
• CaMKⅡ
• TPM1

目的 探讨Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseII,CaMKII)调控原肌球蛋白1(Tropomyosin1,TPM1)在海洛因致心肌细胞节律异常中的作用。方法 提取60只SPF级SD大鼠乳鼠心肌组织，培养原代心肌细胞，根据干预情况分为对照组(Control组)、海洛因处理组(HE组)、海洛因+KN-93处理组(HE+KN-93组)。Control组常规条件未作任何处理，HE组100μmol/L海洛因作用24 h, HE+KN-93组100μmol/L海洛因+1μmol/L抑制剂KN-93作用24 h。荧光倒置显微镜观察心肌细胞自发搏动频率的改变；Fluo-4 AM检测各组细胞内Ca2+浓度的变化；串联质谱标记相对定量蛋白质组学筛查差异表达蛋白；Western blotting法检测TPM1、CaMKIIδ型及其T287位点[p-CaMKII(T287)]表达水平。结果 心肌细胞自发搏动频率结果显示，Control组平均自发搏动频率(126.33±1.52)次/min高于HE组(88.00±2.64)次/min, HE+KN-93组自发搏动频率(110.33±1.52)次/min高于HE组(88.00±2.64)次/min,差异均有统计学意义(P<0.05)。Fluo-4 AM检测结果显示，HE组心肌细胞内Ca2+浓度与Control组比较显著增加(P<0.05);HE+KN-93组细胞内Ca2+浓度与HE组比较显著下降(P<0.05)。串联质谱标记相对定量蛋白质组学结果显示，HE组与Control组共筛选出784个差异表达蛋白质，其中上调差异表达蛋白质有442个，下调差异表达蛋白质有342个；HE组与HE+KN-93组共筛选出346个差异表达蛋白质，其中上调差异表达蛋白质有169个，下调差异表达蛋白质有177个。Western blotting结果显示，HE组p-CaMKII(T287)、TPM1蛋白相对表达量与Control组比较，均显著增加(P<0.05);HE+KN-93组p-CaMKII(T287)、TPM1蛋白相对表达量与HE组比较均降低(P<0.05);3组CaMKIIδ蛋白相对表达量均无统计学意义(P>0.05)。结论 海洛因可造成心肌细胞节律异常改变，其机制可能与CaMKII激活后上调TPM1蛋白有关，这有望为临床上因海洛因导致的心律失常患者提供新的诊疗方向。

• 出版日期2022
• 单位新疆医科大学第一附属医院; 新疆医科大学; 基础医学院