慢病毒介导的miR-34a过表达增强阿霉素对人肝癌细胞的抑制作用

作者：郑顺贞; 孔俊杰; 贺竞毅; 杨凤辉; 刘军

来源：中华普通外科杂志, 2017, 32(10): 879-882.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1007-631X.2017.10.023

• 癌,肝细胞
• 细胞周期
• 细胞凋亡
• 阿霉素

目的构建miR-34a重组慢病毒载体,观察其转染后对肝癌细胞活力、细胞周期和凋亡的影响,并观察转染后对阿霉素体外抑制肝癌细胞生长的影响。方法构建含miR-34a基因的重组慢病毒载体,转染人肝癌细胞并阿霉素干预后,测定细胞活性、检测细胞周期、凋亡及相关蛋白表达水平的变化。结果成功构建了miR-34a的重组慢病毒载体LV-hsa-mir-34a（元件顺序:Ubi-MCSSV40-EGFP-IRES-puromycin）,经质粒酶切和测序鉴定正确。与对照组比较,重组慢病毒载体转染肝癌细胞后miR-34a表达上调,差异有统计学意义（HepG2:t=15.36,P<0.01;Hep3B:t=36.75,P<0.01;Bel-7402:t=24.17,P<0.01）。与对照组比较,miR-34a表达上调并阿霉素干预后肝癌细胞活力下降（HepG2:t=7.12,P<0.01;Hep3B:t=8.89,P<0.01;Bel-7402:t=13.62,P<0.01）,G1期细胞显著增多（HepG2:F=137.65,P<0.01;Hep3B:F=143.39,P<0.01;Bel-7402:F=1 306.47,P<0.01）,细胞凋亡增加（HepG2:F=386.14,P<0.01;Hep3B:F=881.94,P<0.01;Bel-7402:F=885.89,P<0.01）,差异有统计学意义,细胞周期蛋白和凋亡蛋白发生相应改变。结论构建miR-34a重组慢病毒载体并转染肝癌细胞后可高效表达miR-34a,miR-34a高表达可以降低肝癌细胞的恶性生物学行为。miR-34a重组慢病毒载体感染肝癌细胞后,阿霉素对肝癌细胞的抑制作用显著增强。

• 出版日期2017
• 单位山东大学