基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术检测烟草靶斑病发病菌量

作者：李凤巍; 裴悦宏; 张晓枫; 王智; 陈海涛; 徐宸; 冉茂^*; 孙现超^*

来源：西南大学学报(自然科学版), 2023, 45(11): 96-105.

DOI：10.13718/j.cnki.xdzk.2023.11.010

• 烟草
• 烟草靶斑病
• 实时荧光定量PCR

本研究根据烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)与烟草赤星病菌(Alternaria alternata)、烟草棒孢霉叶斑病菌(Corynespora cassiicola)等田间常见烟草叶部病害病原菌的rDNA-ITS(ribosomal DNA Internal Transcribed Spacers, rDNA-ITS)序列差异位点，设计一对特异性检测引物RSW1F/RSW2R,建立烟草靶斑病菌实时荧光定量PCR(Real time fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction, RT-qPCR)快速准确检测体系，并分析烟草靶斑病最低发病菌量.结果表明，设计的引物特异性良好，灵敏度达到1×10-3 ng/μL.利用已获得的实时荧光定量PCR体系计算得出引起烟草靶斑病发病的最低菌量为12.03 pg/μL.此外，对重庆龚滩地区烟叶中烟草靶斑病菌含量进行计算，发现土壤以及周边杂草可能为该地区烟草靶斑病菌的侵染来源，并进一步确定该地区预防烟草靶斑病的最佳时期为5月15日至6月15日，为烟草靶斑病菌的田间预警预报及流行提供理论依据.

• 出版日期2023
• 单位中国烟草总公司重庆市公司烟叶分公司; 西南大学