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摘要
目的探讨特异性靶向MDR1基因的siRNA逆转耐药型卵巢癌细胞株多药耐药的可行性。方法设计靶向于MDR1基因的3条siRNA,用脂质体转染试剂分别转染P-gp阳性表达的卵巢癌SKOV3/AR细胞,RT-PCR检测转染后48小时MDR1 mRNA的变化,流式细胞技术检测转染后72小时P-gp的表达情况;MTT法检测转染前及转染后48小时SKOV3/AR细胞对阿霉素、紫杉醇的敏感性。结果与空白对照组相比,含靶向MDR1基因的siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组的MDR1 mR-NA表达水平均有显著下降(P<0.05),对MDR1 mRNA的抑制率分别为43.3%、41.3%和58.5%,其中siRNA-3组对靶基因的抑制作用较强,而空白对照组、脂质体组和阴性对照siRNA组靶基因表达水平则无明显变化。将siRNA/MDR1-3转染细胞72小时后可观察到P-gp阳性表达率显著降低(P<0.05),其抑制率为37.95%,而空白对照组、脂质体组及阴性对照siRNA组P-gp表达无明显降低(P>0.05)。siRNA-3干扰SKOV3/AR细胞后,阿霉素和紫杉醇的IC50分别下降为干扰前的1/3.56和1/3。结论 RNAi在体外实验能有效逆转卵巢癌细胞的耐药,为其在实体瘤耐药逆转的运用提供了实验依据,值得进一步研究。
- 出版日期2010
- 单位江西省妇幼保健院
