黑木耳核糖体失活蛋白cDNA 3′-端的克隆与分析

作者：邓中枢; 赵恒田; 裴雪; 黄福生

来源：中国野生植物资源, 2010, (04): 37-41.

• 黑木耳
• 核糖体失活蛋白基因
• 3′-快速扩增cDNA末端 Auricuralia auricular
• ribosome-inactivating protein gene
• 3′-RACE

为了克隆黑木耳核糖体失活蛋白cDNA 3′-端,根据随机测得的中间一段蛋白质序列设计简并引物,应用RT-PCR和3′-RACE反应方法,将得到的基因片段与质粒连接,并转化至大肠杆菌中,进行蓝白筛选,再通过琼脂糖凝胶电泳法和PCR法验证白斑,从而得到阳性重组质粒,最后克隆出该目的蛋白基因片段。结果表明,克隆出的cDNA 3′-端为330bp的开放阅读框(ORF),编码107个氨基酸和2个终止密码子。经试验证明和文献检索,克隆得到的cDNA 3′-端为一种新基因。

• 出版日期2010
• 单位中国科学院东北地理与农业生态研究所; 东北农业大学