摘要

目的观察右归饮对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)软骨分化的效果及其诱导的BMSCs/纤维蛋白胶复合物对兔膝关节软骨缺损的修复效果。方法分离兔胫骨和股骨骨髓细胞,传代培养得到兔BMSCs,将兔BMSCs分为对照组、诱导组和右归饮低、中、高剂量组,检测BMSCs细胞中Ⅱ型胶原、聚集蛋白多糖mRNA和蛋白表达情况,筛选右归饮后续实验浓度。将膝关节软骨损伤模型兔随机分为5组,每组6只,其中右归饮组将经筛选浓度的右归饮诱导1周的BMSCs/纤维蛋白胶复合物植入兔软骨缺损部位; TGF-β1组将经转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导1周的BMSCs/纤维蛋白胶复合物植入兔软骨缺损部位;纤维蛋白胶组将纤维蛋白胶植入兔软骨缺损部分;模型组缺损旷置;另设正常对照组不做任何处理。各组均干预8周后,取膝关节软骨缺损部位,通过大体观察、HE染色及Wakitani评分评估软骨损伤修复效果。结果与对照组比较,右归饮中、高剂量组Ⅱ型胶原蛋白、聚集蛋白多糖mRNA和蛋白水平均明显上调,且以右归饮高剂量组效果最好(P <0. 05),故选右归饮400 mg/ml进行后续实验。正常对照组兔膝关节形态正常,表面光滑,无损伤;模型组兔膝关节软骨缺损处呈暗红色,软骨缺损处组织结构不规则,未见软骨细胞,仅可见少量纤维组织,软骨组织Wakitani评分升高(P <0. 05)。纤维蛋白胶组兔膝关节软骨缺损面积变小,软骨缺损处有修复填充物,Wakitani评分降低(P <0. 05)。与纤维蛋白胶组比较,右归饮组和TGF-β1组兔膝关节软骨缺损基本修复完整,修复部位HE染色与周边正常组织较为接近,可见大量软骨细胞,出现软骨陷窝结构,软骨组织Wakitani评分降低(P <0. 05)。结论右归饮可诱导兔BMSCs的成软骨分化,其所诱导的BMSCs/纤维蛋白胶复合物对兔膝关节软骨缺损修复具有促进作用。

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