Anxa5真核表达质粒构建及其对小鼠肝癌Hca-P细胞增殖影响观察

作者：彭博雅; 刘淑清; 田余祥; 李妲; 孙明忠; 唐建武

来源：中华肿瘤防治杂志, 2014, (02): 91-94+99.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2014.02.006

• Anxa5
• 淋巴转移
• 基因转染
• 细胞增殖 Anxa5
• lymphatic metastasis
• gene transfection
• cell proliferation

目的:构建pcDNA3.1-V5/HisB-Anxa5真核表达质粒,获得膜联蛋白A5(Annexin A5,Anxa5)表达稳定上调的小鼠肝癌Hca-P细胞株,探究Anxa5上调对Hca-P增殖的影响。方法:利用RT-PCR扩增小鼠全长Anxa5编码序列,将其克隆到pcDNA3.1-V5/HisB载体中,并将构建的pcDNA3.1-V5/HisB-Anxa5表达质粒转入Hca-P细胞。采用G418筛选及有限稀释法获得单克隆细胞株,观察细胞形态变化。蛋白质印迹法分析Anxa5表达情况,CCK-8法检测相应Hca-P细胞的增殖能力。结果:酶切及测序结果显示,pMD○R18-T-Anxa5克隆质粒和...

• 出版日期2014
• 单位大连医科大学