改良盐析法提取全血基因组DNA的影响因素研究

作者：张帅; 徐锐; 张强; 邓勇; 刘阳; 赖翼

来源：中国现代医学杂志, 2012, (35): 42-46.

• 全血基因组DNA提取
• 改良盐析法
• 红细胞裂解时间
• DNA纯化方式
• DNA干燥时间 genomic DNA extraction from whole blood
• modified salting-out method
• erythrocyte lysis time
• DNA purification method
• DNA drying time

目的观察红细胞裂解时间、DNA纯化方式以及DNA干燥时间对改良盐析法提取全血基因组DNA的影响。方法改良盐析法提取全血基因组DNA时,分别采用不同的红细胞裂解时间、DNA纯化方式以及DNA干燥时间。使用流式细胞术检测红细胞裂解后的细胞总数及死细胞比例,紫外分光光度计检测DNA的浓度和纯度,琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物。结果红细胞裂解时间从10 min延长至120 min,死细胞比例随时间延长而增加,但细胞总数、DNA产量与纯度无明显变化;采用异丙醇沉淀法纯化DNA得到的DNA产量与纯度均显著高于使用DNA分离柱纯化的DNA;DNA干燥时间从120 min缩短至30 min,既不影响DNA的...

• 出版日期2012
• 单位成都医学院