安氏隐孢子虫COWP部分编码基因的表达及免疫原性

作者：任文陟; 郑君; 宫鹏涛; 李建华; 李明英; 刘颖丽; 张西臣

来源：中国兽医学报, 2010, (10): 1326-1329.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.10.013

• 安氏隐孢子虫
• COWP
• 克隆
• 原核表达
• 免疫原性 Cryptosporidium andersoni
• COWP
• cloning
• prokaryotic expression
• immunogenicity

依据NCBI中安氏隐孢子虫囊壁蛋白(COWP)编码基因设计特异性引物,提取安氏隐孢子虫长春株总RNA,RT-PCR扩增目的基因AF,构建重组原核表达载体pET28a-AF,通过大肠杆菌BL21诱导表达,产物经SDS-PAGE以及Western blotting鉴定。然后纯化重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠进行体液免疫和细胞免疫水平的检测。结果显示,重组原核表达质粒pET28a-AF构建成功,Western blotting显示重组蛋白约为18 000,可被安氏隐孢子虫免疫小鼠的多克隆抗体和HRP标记的抗组氨酸抗体识别。重组蛋白免疫BALB/c小鼠的抗体水平差异显著(P<0.05),与对照组相...

• 出版日期2010
• 单位吉林大学