甘蔗宿根矮化病菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

作者：王恒波; 陈平华; 高三基; 郭晋隆; 陈如凯

来源：植物病理学报, 2015, 45(03): 232-238.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.2015.03.002

• 甘蔗
• 宿根矮化病菌
• 实时荧光定量PCR
• 检测

甘蔗宿根矮化病是由Leifsonia xyli subsp.xyli(Lxx)引起的一种世界性甘蔗细菌病害。根据Lxx的Pat1基因保守序列,设计并合成了一对特异性引物Pat1F(5’-GGTTCCATTGCTTACCGATT-3’)/Pat1R(5’-CAAGTTTCGACAGGAACAGC-3’),和一条Taq M an探针(FAM-5’-CCACGGCTACGTCAATTCGGG-3’-TAM RA),建立了一种特异性强、灵敏度高的甘蔗宿根矮化病菌实时荧光定量PCR检测方法。结果表明,本研究建立的实时荧光定量PCR方法,对Lxx的检测最低下限为102copies·μL-1。应用实时荧光定量PCR与常规PCR方法对14个甘蔗品种进行Lxx检测,阳性检出率分别为86%和43%,表明实时荧光定量PCR比常规PCR检测方法具有更高的灵敏度。研究结果为甘蔗宿根矮化病的诊断、田间发生动态监测、脱毒健康种苗检测及品种/材料交换检疫检测提供了新技术支撑。

• 出版日期2015
• 单位福建农林大学; 农业部