大菱鲆血清免疫球蛋白IgM单克隆抗体的制备及其特性分析

作者：张伟; 唐小千; 绳秀珍; 邢婧; 战文斌

来源：中国海洋大学学报(自然科学版), 2016, (01): 27-32.

DOI：10.16441/j.cnki.hdxb.20140430

• 大菱鲆
• 血清IgM
• 单克隆抗体
• 免疫荧光
• 流式细胞术 Scophthalmus maximus
• serum immunoglobulin M
• monoclonal antibody
• immunofluorescence
• flow cytometry

本研究运用硫酸铵盐析法结合Protein A亲和层法从大菱鲆血清中分离、纯化免疫球蛋白IgM。SDS-PAGE分析结果显示,纯化的血清IgM主要有2条蛋白带,分子量分别为78和27kDa,分别为大菱鲆IgM的重链与轻链。以纯化的IgM免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合,将融合后的细胞置于含HAT的培养基中培养。利用ELISA和Western blotting筛选杂交瘤,并利用有限稀释法对阳性杂交瘤进行单克隆,最终共获得3株抗大菱鲆血清IgM单克隆抗体,分别命名为1B2、1G4和2A1,抗体分型结果显示3株单抗均属IgG。Western blotting结果显示,单抗...

• 出版日期2016
• 单位中国海洋大学