山羊痘病毒SERPIN蛋白抑制宿主细胞凋亡活性的鉴定

作者:郑敏; 梁媛; 韦显凯; 刘棋; 莫胜兰; 施开创; 李春艳; 郑列丰; 李军
来源:中国兽医科学, 2013, (01): 15-21.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2013.01.006

摘要

采用PCR扩增长为1 041bp的山羊痘病毒(GTPV)serpin基因,构建真核表达质粒pcDNA-Ser-pin;将其转染HeLa细胞,经G418筛选,克隆纯化、鉴定,获得1株稳定表达GTPV SERPIN蛋白的HeLa细胞株;然后通过检测凋亡诱导剂TNF-α和放线菌酮作用后的细胞形态学变化、细胞活力和caspase活性,对GTPV SERPIN蛋白抑制宿主细胞凋亡的活性进行了鉴定。序列分析结果表明,GTPV SERPIN与正痘病毒SPI-1和SPI-2的氨基酸序列同源性为36%~38%;与痘苗病毒SPI-2空间构型相近,VADC基序和P1氨基酸(天门冬氨酸)相同。细胞试验结果显示,GTP...

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