黑曲霉外源表达系统对Dactylellina cionopaga基因PrD Ⅰ的表达

作者：于寒颖; **; 段俊欣

来源：生物技术, 2012, (03): 38-43.

• 食线虫真菌
• Dactylellina cionopaga
• 丝氨酸蛋白酶
• 外源表达
• 黑曲霉
• 表达载体 nematophagous fungi
• Dactylellina cionopaga
• serine proteinase
• exogenous expression
• Aspergillus niger
• expression vector

目的:Dactylellina cionopaga是产生黏性分枝的捕食线虫真菌,进行其基因外源表达是鉴定该菌侵染相关因子的途径之一。方法:该文构建了含有组氨酸标签的黑曲霉表达载体pGT21M-HIS,对D.cionopaga中与侵染机制相关的丝氨酸蛋白酶基因PrD Ⅰ进行了外源表达。结果:RT-PCR鉴定结果显示,PrDⅠ在黑曲霉201中获得了转录。SDS-PAGE和酶活分析结果表明,经亲和层析纯化的重组蛋白分子量约为45kDa,在pH 5.0的条件下具有蛋白水解活性。纯酶液的蛋白浓度为30μg/ml。结论:构建的带有组氨酸标签的表达载体pGT21M-HIS能够用于基因在黑曲霉表达系统中的外源...

• 出版日期2012
• 单位中国科学院微生物研究所; 东北石油大学