脐带间充质干细胞来源的外泌体通过抑制TGF-β1/Smad 3通路修复单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化

作者：俞静; 戴世荣; 单荣梅; 刘香^*

来源：现代泌尿外科杂志, 2022, 27(07): 593-599.

• 肾间质纤维化
• 外泌体
• 腺病毒
• shRNA
• TGF-β1
• 单侧输尿管梗阻
• 大鼠

目的 探索来源于脐带间充质干细胞(huc-MSCs)的含有腺病毒-TGF-β1 shRNA的外泌体对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠纤维化肾组织的靶向性和缓解肾间质纤维化的疗效。方法 构建单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型；腺病毒-TGF-β1 shRNA转导脐带间充质干细胞，收集其外泌体；采用纳米粒子追踪分析、透射电子显微镜、Western blot法和RT-qPCR法对外泌体及其对TGF-β1的干扰效率进行鉴定；IVIS Lumina系统荧光成像技术分析外泌体在体(in vivo)分布情况；HE染色、Masson染色、TGF-β1免疫组织化学染色(IHC)分析外泌体对UUO大鼠肾间质纤维化的疗效；Western blot法检测大鼠肾组织Collagen I、Fibronectin、α-SMA以及TGF-β1、p-Smad 3和Smad 3的表达情况。结果 含有腺病毒TGF-β1 shRNA的外泌体在体外对TGF-β1具有显著的敲低效率(P<0.01)。此外泌体经尾静脉注射至大鼠体内后，大部分聚集于左侧损伤肾脏，具有定向迁移能力。相对于UUO组大鼠而言，经含有腺病毒-TGF-β1 shRNA的外泌体治疗后，能够明显缓解UUO大鼠肾间质纤维化的程度，HE染色和Masson染色显示的肾间质组织胶原纤维沉积显著减少；IHC染色显示TGF-β1表达明显被抑制(P<0.01)。Western blot结果显示，相较于UUO组，外泌体治疗组大鼠纤维化肾组织的Collagen I、Fibronectin和α-SMA表达显著降低(P<0.01);TGF-β1和磷酸化-Smad 3(P<0.01)被显著抑制。结论 将huc-MSCs来源的含有腺病毒-TGF-β1 shRNA的外泌体尾静脉注射至UUO大鼠体内，外泌体能够特异性靶向纤维化的肾组织并通过抑制TGF-β1/Smad 3通路修复肾间质纤维化。

• 出版日期2022
• 单位南通市第二人民医院