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摘要
目的:探讨大鼠胰岛分离纯化的方案。方法:采用胰管内灌注胶原酶Ⅴ消化、Histopaque-1077密度梯度离心分离纯化20只雄性SD大鼠胰岛。椎虫蓝染色判断胰岛存活率,双硫腙染色后计数胰岛,葡萄糖刺激胰岛素释放实验评估胰岛功能,同种异体胰岛门静脉移植治疗5只链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠,监测血糖变化。结果:分离纯化后平均胰岛得率为(646±67)个/大鼠,存活率达到90%以上。新鲜分离的胰岛呈椭圆或圆形,悬浮于培养液面,胞膜光滑完整,直径大于150μm的细胞团占95%以上。葡萄糖刺激的胰岛素释放试验结果表明:第1、3、5天胰岛的刺激指数分别为2.6倍、1.7倍和1.4倍,两组间低糖和高糖的胰岛分泌量差异均有显著性(P<0.05)。胰岛门静脉移植术后,第2天大鼠血糖降至11.1mmol/L,8天内血糖可控制在15mmol/L以下,随后血糖逐步升高。结论:采用胰管内灌注胶原酶Ⅴ消化联合Histopaque-1077分离纯化是一种较好的大鼠胰岛分离方法,胰岛得率较高且功能良好。
- 出版日期2007
- 单位南京医科大学第一附属医院
