幽门螺杆菌CagA蛋白与CTB融合基因的克隆及其植物表达载体的构建

作者：姜云水; 方平楚; 付亚萍; 朱诚

来源：科技通报, 2004, (03): 189-193.

DOI：10.13774/j.cnki.kjtb.2004.03.003

• 生物工程
• 幽门螺杆菌
• cagA基因
• CTB基因
• 水稻Wx启动子
• 基因融合
• 植物表达载体 bio-engineering
• helicobacter pylori
• cytotoxin assiociated gene
• Cholera Toxin B subunit gene
• Wx promoter of rice
• gene fusion
• plant expression vector

目的　构建能在水稻胚乳中特异表达的幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)和霍乱毒素B亚单位(CTB)的植物表达载体.方法　采用高保真PCR技术分别从质粒pGEM CTB和幽门螺杆菌基因组DNA中扩增出CTB和cagA基因,然后用PCR方法直接融合CTB基因和cagA基因.又用PCR法改造了水稻Wx启动子,在其3′端融合加入Ω序列和Kozak序列.通过一系列亚克隆最终将两个融合基因和NOS终止子插入根癌农杆菌双元载体pCAMBI A1300的表达框架内.结果　PCR验证和测序分析证明,CTB和cagA融合基因以正确的方向插入到载体pCAMBI A1300中,并位于水稻Wx启动子后.结论　成功构建...

• 出版日期2004
• 单位水稻生物学国家重点实验室; 浙江大学; 生命科学学院; 中国水稻研究所