摘要

取新鲜牛肝,经匀浆、缓冲液抽提、正丁醇脱脂、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析等方法纯化,获得了电泳纯的牛肝谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH)。经过纯化后的结果:GDH的酶比活力为306.06 U/mg,纯化倍数为93.60倍,酶活回收率为23.12%。GDH的分子质量为380.2 k D,亚基分子质量约为61.7 k D。酶学性质研究结果表明:GDH的最适反应温度为50℃,在温度为30℃以下时较稳定;最适反应p H值为8.2,该酶对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine d...