鸡细胞色素P450 1A5的原核表达与活性重组

作者：安俊峰; 王运浩; 侯鑫

来源：生物技术通报, 2012, (06): 94-98.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.06.011

• 细胞色素
• P4501A5(CYP1A5)
• 异源表达
• 体外重组
• 酶活性 Cytochrome P450 1A5(CYP1A5) Heterologous expression Reconstitution in vitro Enzymatic activity

旨在对鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)蛋白进行体外功能研究,采用大肠杆菌系统进行CYP1A5的异源表达。以鸡的cDNA为模板,扩增出CYP1A5基因,将该基因的N端编码区进行修饰,并连接到pCW载体中构建His-CYP1A5,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达。经CO-差示光谱检测,所获得的His-CYP1A5具有典型的P450吸收峰。该蛋白与细胞色素P450还原酶(CPR)进行体外重组,构成的重组酶系表现出乙氧基试卤灵-O-脱乙基酶活性。结果表明,所采用的表达策略可以成功产生出具有催化活性的鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)蛋白。

• 出版日期2012
• 单位内蒙古大学