牛PSMA5基因RNA干扰载体的构建与筛选及在奶牛乳腺上皮细胞中的表达

作者：迟玉杨; 张晶; 徐子娴; 高安崇; 王秀娜; 周长海; 牛淑玲; 金永成; 沈景林

来源：中国兽医学报, 2016, 36(01): 112-131.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2016.01.20

• PSMA5
• 共轭亚油酸
• MAC-T
• RNA干扰载体

设计4条待选的shRNA序列以及1条阴性对照序列,构建RNA干扰载体,然后转染到奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)中,最后利用实时荧光定量PCR和Western blotting技术分别检测蛋白酶体α5亚基(PSMA5)在奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)中mRNA和蛋白水平的表达。结果显示:转染shRNA-1组,shRNA-3组和shRNA-4组的PSMA5基因相对表达量显著低于阴性对照组(P<0.05),且shRNA-4组的PSMA5基因相对表达量最低。结果表明:本试验成功构建并筛选出了PSMA5基因RNA干扰载体,并在奶牛乳腺上皮细胞(MAC-T)中成功表达。

• 出版日期2016
• 单位吉林大学; 动物科学学院