禽流感病毒H5N1血凝素基因在昆虫细胞中的表达及鉴定

作者：温坤; 丘立文; 王压娣; 车小燕

来源：南方医科大学学报, 2007, (01): 20-23.

• 禽流感病毒
• 血凝素抗原
• 杆状病毒
• 昆虫细胞 avian influenza A virus
• hemagglutinin
• baculovirus
• insect cells

目的应用杆状病毒-昆虫细胞表达体系克隆及表达禽流感病毒H5N1血凝素H5抗原,鉴定其抗原性和生物活性。方法PCR扩增禽流感病毒H5全长基因序列,克隆、转化制备重组杆状病毒Bacmid质粒,通过转染昆虫细胞制备重组杆状病毒进行蛋白表达。采用细胞免疫荧光、Westernblotting和血凝试验分别对表达的蛋白进行抗原性和生物活性分析。结果在昆虫细胞中成功表达禽流感病毒重组his-H5蛋白,其相对分子质量约为64000,与豚鼠红细胞能够发生凝集反应,免疫荧光与Westernblotting结果提示该重组蛋白能够与禽流感病毒H5标准血清中的抗体特异性结合。结论经杆状病毒-昆虫细胞表达系统获得的重组h...

• 出版日期2007
• 单位南方医科大学珠江医院