过表达SHOX2对BMP9诱导的小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2成骨分化的影响

作者：张平; 袁晓慧; 黄华坤; 杨春梅; 张露露; 罗小辑; 罗进勇^*

来源：基础医学与临床, 2021, 41(01): 1-7.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2021.01.002

• 矮小身材同源框2(SHOX2)
• 骨形态发生蛋白9(BMP9)
• 成骨分化
• C3H10T1/2细胞

目的研究矮小身材同源框2(SHOX2)对骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导的小鼠间充质干细胞系C3H10T1/2成骨分化的影响。方法构建SHOX2重组腺病毒(Ad-SHOX2),实验分为对照(NC)组、Ad-SHOX2组、BMP9组和BMP9+Ad-SHOX2组。碱性磷酸酶(ALP)评估早期成骨;钙盐沉积检测晚期成骨;显微镜观察细胞增殖;Western blot检测成骨相关转录因子(RUNX2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、ERK1/2磷酸化及总蛋白表达。结果成功构建Ad-SHOX2。Ad-SHOX2组与BMP9组较NC组ALP活性、钙盐结节及RUNX2蛋白表达明显上升(P<0.05)。相较于以上两组,BMP9+Ad-SHOX2组ALP活性增高(P<0.05),低感染率BMP9+Ad-SHOX2组钙盐结节减少。高感染率组则较BMP9组钙盐沉积增多,与Ad-SHOX2组无明显差异。同时,BMP9+Ad-SHOX2组RUNX2蛋白表达高于BMP9组,低于Ad-SHOX2组(P<0.05)。显微镜观察Ad-SHOX2组与BMP9组细胞密度均高于NC组,PCNA蛋白表达上调(P<0.05)。且BMP9+Ad-SHOX2组PCNA蛋白表达高于BMP9组(P<0.05)。此外,Ad-SHOX2组及BMP9+Ad-SHOX2组较NC组T-ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达增高(P<0.05)。结论无外源性成骨刺激因子诱导条件下,SHOX2可能通过调控MAPK/ERK信号通路促进C3H10T1/2细胞增殖及成骨分化,但其与BMP9对成骨分化的调控作用是否可能互为拮抗,有待进一步研究。

• 出版日期2021
• 单位重庆医科大学; 重庆医科大学附属第一医院