肺炎支原体MPN 668蛋白的克隆和表达与纯化

作者：陈列松; 游晓星; 刘良专; 曾焱华; 吴移谋

来源：当代医学, 2013, (29): 23-24+160.

• 肺炎支原体
• MPN 668
• 融合蛋白

目的克隆表达与纯化肺炎支原体mpn 668蛋白。方法以Mp 129株基因组DNA为模板,PCR法扩增目的基因mpn 668,将其亚克隆至pGEX-6 P-1载体中。经鉴定后将其转化至表达菌E.coli BL 21中进行诱导表达。采用SDS-PAGE和蛋白质印迹等方法对表达产物进行分析鉴定并纯化GST融合蛋白。结果成功扩增出总长度为423 bp的mpn 668基因,所构建的原核重组质粒经PCR、双酶切以及测序鉴定与预期目的基因相符。SDS-PAGE显示,IPTG可诱导一分子量约为41 kD的可溶性GST融合蛋白,经GST·BindTMPurification Kit纯化后,纯度可达95%以上。结...

• 出版日期2013
• 单位南华大学