nptⅡ基因真菌表达载体的构建及在苹果炭疽叶枯病菌遗传转化中的应用

作者：吴建圆; 冀志蕊; 李壮; 程存刚; 周宗山; 张俊祥

来源：基因组学与应用生物学, 2015, 34(10): 2156-2160.

DOI：10.13417/j.gab.034.002156

• 炭疽病
• 新霉素磷酸转移酶基因
• 农杆菌
• 启动子

本研究旨在构建1个适用于苹果炭疽叶枯病菌(Glomerella cingulata)的遗传转化载体,为系统研究该病原菌基因的功能提供便利。通过基因工程及分子生物学技术,将三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因启动子Pgap和新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)连结于质粒p Cambia0380中。构建的载体p Gapneo R1导入根癌农杆菌LBA4404后,通过农杆菌介导的转化技术(ATMT),成功将nptⅡ基因盒整合到苹果炭疽叶枯病菌基因组中。Southern blot分析结果表明,随机挑取的转化子T-DNA均以单拷贝插入到苹果炭疽叶枯病菌基因组中,表明该载体适合于苹果炭疽叶枯病菌的遗传转化。此外,该载体也可用于构建苹果炭疽叶枯病菌的目标基因的回补载体、超表达载体和荧光融合蛋白表达载体。

• 出版日期2015
• 单位中国农业科学院果树研究所