丙型肝炎病毒RNA聚合酶在HepG-2细胞的稳定表达及活性分析

作者：熊舒珺; 吴晓玉; 孔令保

来源：实用医学杂志, 2010, (03): 355-357.

• 肝炎病毒属
• RNA聚合酶
• HepG-2细胞
• 表达
• 活性 Hepacivirus
• RNA polymerase
• HepG-2 cells
• Expression
• Activity

目的:探讨丙型肝炎病毒RNA聚合酶(NS5B)在肝癌细胞株HepG-2的稳定表达与活性。方法:ScaⅠ酶切含有丙型肝炎病毒NS5B基因的重组表达载体pcDNA-5B,线性化的pcDNA-5B通过脂质体介导转染HepG-2细胞,G418筛选转染细胞。阳性细胞经基因组PCR、RT-PCR和Western Blot鉴定。体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验鉴定稳定表达NS5B蛋白的RNA聚合酶活性。结果:NS5B基因可整合到转染的HepG-2细胞的染色体上,并能有效转录和表达。体外RNA聚合酶试验和荧光素酶试验表明稳定表达的NS5B在体外和细胞内均具备RNA依赖的RNA聚合酶活性。结论:肝细胞HepG...

• 出版日期2010
• 单位江西农业大学