摘要

以一株表达猪-α干扰素(pIFN-α)重组毕赤酵母为研究对象,考察了诱导温度对pIFN-α表达、细胞代谢活性及甲醇代谢关键酶的影响。在5 L发酵罐开展毕赤酵母高密度流加培养生产表达pIFN-α研究,利用实时PCR技术对不同诱导温度、诱导稳定期的胞内甲醇代谢关键酶(包括解毒酶)基因转录水平进行定量分析。低温(20℃)可以同时提高细胞的代谢活性和猪-α干扰素的表达水平,低温(20℃)下最高pIFN-α抗病毒活性达到5.57×10~6IU/mL,是30℃常温诱导下最高抗病毒活性(2.9×10~5IU/mL)的19.2倍;相比于30℃常温诱导,20℃下醇氧化酶(AOX)、甲醛脱氢酶(FLD)、甲酸脱氢...