淀粉酶基因的克隆及其在工业啤酒酵母中的表达

作者：刘增然; 何秀萍; 龙章富; 张博润; 刘世贵

来源：食品科学, 2004, (09): 78-82.

• 工业啤酒酵母菌
• 淀粉酶
• 基因的克隆和表达 industrial strain of S. cerevisiae
• amylase
• gene cloning and expression

以扣囊复膜孢酵母菌总DNA为模板, 通过PCR扩增克隆到约1.5kb的α-淀粉酶基因(AMY)。用酵母菌穿梭载体YEp352为出发质粒,磷酸甘油酸激酶基因1(PGK1)启动子和乙醇脱氢酶基因1(ADH1)终止子为调控元件构建了含α-淀粉酶基因编码序列的酵母菌重组表达质粒pLA8。pLA8导入工业啤酒酵母菌,在以淀粉为唯一碳源的YNBS培养基上筛选阳性转化子,转化子培养液中α-淀粉酶活性为1.1U/ml,细胞破碎液的酶活性为0.3U/ml,而受体菌培养液及细胞破碎液中未检测到α-淀粉酶活性。

• 出版日期2004
• 单位四川大学; 中国科学院微生物研究所