摘要

目的 探讨长链基因间非编码RNA环加氧酶2(lincRNA-COX2)在单核细胞增生李斯特菌(Lm)感染所致RAW264.7细胞凋亡和细胞极化中的作用。方法 体外培养RAW264.7细胞,分为未感染对照组、 Lm感染组、小干扰RNA阴性对照(si-NC)组、 si-NC联合Lm组、 lincRNA-COX2小干扰RNA(si-lincRNA-COX2)组、 si-lincRNA-COX2联合Lm组。Lm感染复数(MOI)=10感染RAW264.7细胞,细菌感染6 h后收集细胞,倒置荧光显微镜和实时定量PCR检测siRNA转染抑制效率,Western blot法检测细胞中裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、 caspase-3、 B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)、精氨酸酶1(Arg1)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白水平。结果 Lm感染RAW264.7细胞后,c-caspase-3/caspase-3、 BAX/Bcl2比值、 iNOS蛋白水平较对照组显著上调,而Arg1水平较对照组下调。敲低lincRNA-COX2可抑制Lm感染引起的RAW264.7细胞中BAX/Bcl2、 c-caspase-3/caspase-3及iNOS蛋白的升高,上调Lm感染后RAW264.7细胞中的Arg1蛋白。结论敲低lincRNA-COX2抑制Lm感染引起的RAW264.7细胞凋亡并抑制其向M1型极化。

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