拟南芥DELLA蛋白编码基因RGA和GAI的原核表达和多克隆抗体制备

作者：王玮; 管利萍; 张静; 侯岁稳

来源：兰州大学学报(自然科学版), 2016, 52(03): 422-428.

DOI：10.13885/j.issn.0455-2059.2016.03.023

• 拟南芥
• DELLA蛋白
• 原核表达
• 包涵体
• 多克隆抗体

通过聚合酶链反应方法扩增了RGA和GAI两个拟南芥DELLA蛋白基因,并将其克隆到pGEX-4T-3原核表达载体上,转化大肠杆菌Rosetta菌株,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达了分子量为90 kD的GST-RGA和分子量为85 kD的GST-GAI融合蛋白,这两种融合蛋白均以包涵体的形式存在.将包涵体直接作为抗原免疫新西兰白兔,制备出多克隆抗体血清,血清效价超过1:400 000.WB分析结果表明这两种抗体可以特异性识别拟南芥RGA和GAI蛋白,为进一步研究DELLA蛋白的调控机制奠定了基础.

• 出版日期2016
• 单位兰州大学; 生命科学学院