杆状病毒介导的靶向DNA甲基转移酶1 siRNA表达载体的构建

作者：张尤历; 王晓燕; 徐岷; 吴岩; 吴莺; 焦志军

来源：江苏大学学报(医学版), 2011, (03): 237-240.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.2011.03.021

• 杆状病毒载体
• DNA甲基转移酶1基因
• RNA干扰
• 胰腺癌 baculovirus carrier
• DNA methyltransferase 1
• RNAi
• pancreatic cancer

目的:构建携带DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)RNAi基因的重组杆状病毒载体,以进一步研究DNMT1对胰腺癌相关基因的影响。方法:首先将带有BglⅡ和HindⅢ酶切黏性末端的60 bp正义和反义寡核苷酸退火,与用BglⅡ和HindⅢ双酶切后的线性化载体pSUPER连接构建成pSUPER si-DNMT1-D,然后将H1启动子和RNAi序列从上述重组载体切下,插入至同样双酶切的pFastBac1载体,经过转座重组,抽提重组BacmidDNA,转染草地贪夜蛾细胞Sf9,获得重组杆状病毒Bac-si-DNMT1-D。将上述重组杆状病毒感染胰腺癌PaTu...

• 出版日期2011
• 单位江苏大学