旋毛虫T668基因真核表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达

作者:白雪; 吴秀萍; 王学林; 王鑫蕊; 于建立; 唐斌; 刘国兴; 冯爽; 陈根元; 刘明远
来源:中国兽医学报, 2010, (04): 469-472.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.04.016

摘要

利用RT-PCR技术从中国河南猪旋毛虫(国际标准虫种编号为ISS534)新生幼虫得到T668基因,并克隆入pEGFP-N1真核表达载体中构建重组质粒,该重组质粒在脂质体介导下转染BHK细胞。EGFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,Western blotting鉴定,细胞裂解液样品中有1条约77 000的条带,可被绿色荧光抗体及猪感染旋毛虫阳性血清所识别,与预计大小一致,表明成功构建T668-pEGFP-N1真核表达质粒,并在BHK细胞融合表达,表达产物具有抗原性。

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