大鼠血管内皮细胞siRNA转染条件的优化

作者:郭昭涵; 李银河; 庞振凌; 彭明星; 黄冉涛; 王燕华
来源:河南师范大学学报(自然科学版), 2015, (06): 107-111.
DOI:10.16366/j.cnki.1000-2367.2015.06.020

摘要

目的:旨在优化siRNA转染大鼠血管内皮细胞的转染条件.方法:将0.75μL和1.5μL的脂质体LipofectamineTM3000分别与20、40、60、80nmol带荧光标记的FAMsiRNA组合,转染6、12、18、24h后,用荧光显微镜计数阳性细胞率、MTT法检测各浓度条件下内皮细胞的存活率,筛选最优转染条件.结果:(1)转染12h后,用荧光显微镜检测20、40、60、80nmol各组,均可观察到绿色荧光(2)siRNA浓度为60nmol/L,脂质体为1.5μL的组合转染效率最高,继续增加siRNA的浓度,转染效率提高不明显.(3)转染时间超过24h,各组细胞荧光减弱,细胞死亡率显著...

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