鞘蕊苏贝壳杉烯酸氧化酶基因的克隆及表达载体的构建

作者：马朝芝; 黄晓; 余坤; 尤朋涛; 刘焱文; 但汉雄^*

来源：基因组学与应用生物学, 2018, 37(09): 3919-3925.

DOI：10.13417/j.gab.037.003919

• 鞘蕊苏
• 贝壳杉烯酸氧化酶
• PCR
• 表达载体

为提高鞘蕊苏有效成分的含量,开展Coleus Ent-kaurenoic acid oxidase(KAO)基因的克隆以及表达载体构建方面的研究。提取鞘蕊苏叶片的总RNA,利用套式PCR技术克隆获得KAO基因全长,将该基因连接到克隆载体p MD-18T,经测序鉴定正确后,再将该基因连接到p ET-28a表达载体中。结果显示,成功克隆出的鞘蕊苏KAO基因大小为1 500 bp,对克隆基因进行测序及酶切鉴定,均得到正确大小的DNA片段,说明表达载体构建成功。本研究成功克隆得到鞘蕊苏贝壳杉烯酸氧化酶基因并构建其表达载体,为提高鞘蕊苏有效成分含量提供了基础。

• 出版日期2018
• 单位湖北中医药大学