大豆再生抑制消减杂交文库的构建

作者:武小霞; 孙晶; 苏安玉; 李静; 刘明; 张彬彬; 李冬梅; 李文滨
来源:东北农业大学学报, 2014, (07): 38-44.
DOI:10.19720/j.cnki.issn.1005-9369.2014.07.007

摘要

大豆再生受基因型限制,高效稳定再生体系建立难、遗传转化效率低,影响生物技术的应用。为获得与大豆再生相关基因,解析大豆再生基因分子机制,从而建立高效、稳定再生体系,为生物技术在大豆分子育种中的应用奠定基础。文章利用抑制性消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH),以东农50子叶节为材料构建消减杂交cDNA文库,从文库中随机挑取917个阳性克隆,PCR鉴定插入片段大部分集中在100~750 bp,利用BLAST在GenBank数据库进行序列相似性比对,经过同源性比对归并后得到411个高质量ESTs片段,功能分析表明,这些基因与信号转导、葡萄糖...

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