Anti HER2 ScFv-GFP融合抗体靶向检测HER2的表达

作者：高国辉; 陈翀; 杨艳梅; 杨涵; 王金丹; 郑易; 黄奇迪; 胡孝渠

来源：生物工程学报, 2012, (08): 1002-1014.

DOI：10.13345/j.cjb.2012.08.011

• 抗HER2单链抗体
• 绿色荧光蛋白
• 融合抗体
• HER2阳性肿瘤细胞
• HER2检测功能
• 分子诊断 Anti HER2 single-chain Fv antibody
• green fluorescent protein
• fusion antibody
• HER2 positive cancer cells
• clinical HER2 detection function
• molecular diagnostics

为验证真核表达的携带绿色荧光的抗HER2单链抗体应用于临床诊断HER2阳性肿瘤细胞和病理组织的可靠性,构建融合基因Anti HER2 ScFv-GFP,重组入pFAST Bac HT A载体,在昆虫细胞Sf9中表达,以Ni2+-NTA亲和层析法纯化Anti HER2 ScFv-GFP融合蛋白,测定其浓度与纯度,将同浓度的纯化蛋白分别与3种乳腺癌细胞BT474、SKBR3和MCF7各混合12 h、24 h和48 h,分析其在不同时间段结合HER2阳性肿瘤细胞的稳定性。用纯化蛋白直接检测经抗原修复的乳腺癌病理组织,与免疫组织化学法检测结果对比。结果在昆虫细胞Sf9中可观察到明显绿色荧光,纯化的融合...

• 出版日期2012
• 单位温州医科大学