精液保存和优化处理方法对精子DNA完整性的影响

作者:郑毅春; 梁嘉颖; 杜鹏; 莫国柱; 汪李虎; 刘风华
来源:中华男科学杂志, 2016, 22(05): 432-436.
DOI:10.13263/j.cnki.nja.2016.05.009

摘要

目的:探讨不同精液保存和处理方法对精子DNA完整性的影响。方法:筛选2015年112月就诊的100例精液正常志愿者,将每例志愿者的精液混匀后分别对其进行不同的保存和优化处理;保存方法包括直接冷冻法、试剂冷冻法、室温保存4 h和24 h等,优化处理方法包括简单洗涤法、直接上游法和非连续密度梯度离心法。保存和处理后均采用精子染色体扩散实验(SCD)分析其精子DNA碎片指数(DFI);优化处理各组继续培养24 h,培养后再分析其精子活动率和DFI。结果:精液保存条件两两组间分析显示,直接冷冻法、试剂冷冻法和室温保存4 h的精子DFI分别为(27.3±6.4)%、(26.9±6.1)%和(24.7±6.8)%,结果无显著性差异(P>0.05),而室温保存24 h则显著增加精子DFI[(35.6±9.0)%](P<0.05)。与简单洗涤法的精子DFI[(13.7±2.0)%]相比,直接上游法的精子DFI[(9.1±1.3)%]和非连续密度梯度离心法的精子DFI[(8.0±2.5)%]均显著降低(P<0.05);再培养24 h后,非连续密度梯度离心法处理的精子DFI[(11.5±4.2)%]最低(P<0.05)。结论:保存条件和优化处理方法对精子DNA完整性有影响,临床工作中需选取最合适的精液处理方法。

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