农杆菌介导的获取疏绵状嗜热丝孢菌插入突变体体系的建立(英文)

作者：韩华; 徐晓雪; 彭延杰; 孔德慧; 李多川

来源：微生物学报, 2012, (12): 1449-1457.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2012.12.011

• 农杆菌介导转化
• 插入突变体
• 疏绵状嗜热丝孢菌
• 嗜热真菌 Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(ATMT)
• insretional mutagenesis
• Thermomyces lanuginosus
• thermophilic fungus

【目的】建立疏绵状嗜热丝孢菌的稳定遗传转化体系并获得插入突变体。【方法】利用农杆菌介导的方法建立疏绵状嗜热丝孢菌的遗传转化体系;分别通过Southern杂交、克隆转移DNA(T-DNA)侧翼序列来确定T-DNA在疏绵状嗜热丝孢菌基因组中的拷贝数和插入位点。【结果】成功建立了可靠的疏绵状嗜热丝孢菌的遗传转化体系。共培养过程中使用萌发孢子是成功建立疏绵状嗜热丝孢菌遗传转化体系的必要条件。疏绵状嗜热丝孢菌萌发的孢子与农杆菌在28℃共培养48h时,转化效率最高。乙酰丁香酮(AS)在农杆菌预培养及疏绵状嗜热丝孢菌萌发的孢子与农杆菌的共培养阶段都是必需的,且在共培养阶段当AS浓度为500μM时转化效率最高...

• 出版日期2012
• 单位山东农业大学