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摘要
适体酶是一种常用的人工核糖开关，被广泛用于基因表达调控，目前报道最多且更加成熟的仍是抑制类型（OFF）的适体酶，激活类型（ON）的适体酶报道的较少且效率不高，为获得更多激活类型的适体酶，设计并验证可响应卡那霉素调节的激活型适体酶。通过理性设计适体酶linker部分，使用适体酶控制表达卡那霉素抗性基因和荧光蛋白，在大肠杆菌中进行验证及评估。设计了7个不同linker的适体酶结构，在通过大肠杆菌平台进行验证时，其中4个无法在卡那霉素抗性平板上正常生长，3个结构能够正常生长，引入荧光蛋白评估这3个结构发现，这3个结构都能够响应卡那霉素的调节，其调控效率分别为1.93倍、2.99倍和1.43倍。本研究成功实现了在大肠杆菌中对抗生素类型适体酶的验证和评估，并且通过这一策略获得了3个激活类型，响应卡那霉素调节的适体酶结构。
- 出版日期2022-3-21
- 单位中国科学院成都生物研究所; 中国科学院大学; 湖南大学
