牛GM-CSF与金黄色葡萄球菌黏附素FnBPB共表达质粒的构建与原核表达

作者：范鑫; 郝永清; 张爱荣; 陈晓杰

来源：动物医学进展, 2011, (10): 79-82.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2011.10.033

• 金黄色葡萄球菌
• 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
• 纤连素结合蛋白B
• 重叠延伸PCR克隆
• 原核表达 Staphylococcus aureus
• granulocyte-macrophage colony stimulating factor
• fibronectin-binding proteins B
• overlap extension PCR
• prokaryotic expression.

采用PCR方法对牛粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和金黄色葡萄球菌FnBPB的D区进行特异性的扩增,并通过重叠延伸PCR扩增GM-CSF-FnBPB串联基因,构建了克隆质粒pMD19-GM-CSF-FnBPB。利用表达载体pET-32a( )对该融合基因片段进行原核表达,SDS-PAGE分析表明,在1mmol/L IPTG诱导浓度下,在39ku处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western blot分析表明,该蛋白具有反应原性,进而证明该融合基因成功在原核细胞中表达。

• 出版日期2011
• 单位内蒙古农业大学