ApxⅢ包涵体蛋白纯化和变性条件的研究

作者:王冬梅; 董开忠; 蔡勇; 刘翊中; 杨具田
来源:西北民族大学学报(自然科学版), 2011, (03): 54-57.
DOI:10.14084/j.cnki.cn62-1188/n.2011.03.018

摘要

为摸索重组ApxⅢ蛋白的纯化条件,采用IPTG诱导pET-apxⅢA/JM109,表达产物以包涵体形式存在.收集诱导后菌体,经冻融-超声破菌得到粗包涵体,经10 mmol/LTris-HCl、Triton X-100和2 mol/L尿素依次洗涤.包涵体沉淀分别用含有8 mol/L尿素和6 mol/L盐酸胍的溶液变性溶解.聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析结果表明:经洗涤包涵体纯度提高;8 mol/L尿素和6 mol/L盐酸胍都不能使ApxIII包涵体完全溶解.

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